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2×Taqman qPCR Mix(Low ROX)图片
产品货号:
GS2283
中文名称:
2×Taqman qPCR Mix(Low ROX)
英文名称:
2×Taqman qPCR Mastermix(Low ROX)
产品规格:
4×1.25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是一种2×浓度的荧光探针定量PCR预混反应液,包含dNTPs、Hotstart Taq polymerase、MgCl2、参考染料和独特的缓冲组分。本制品适用于以TaqMan探针为基础的DNA样品实时PCR分析。本制品具有灵敏度高、信噪比高和特异性强等特点。




ABI7500;StratageneMx3000,Mx3005,Mx4000


组分规格
2×Taqman qPCR Mix(Low ROX)4×1.25mL
说明书1份

保存:-20℃,避光,有效期2年。


  • 每次实验后,已溶解的剩余混合液如果三个月内再次使用,可保存于4℃。2×Taqman qPCR Mix(Low ROX)在储存条件合理,操作得当的条件下可稳定保存2年。
  • 反应混合液准备好后即开始PCR,PCR反应开始前始终将反应混合液放在冰盒中冷却。



  • SNP基因型检测。
  • 基因表达分析。
  • 芯片验证。
  • 高通量筛选。



  • 冰上溶解2×Taqman qPCR Mix(Low ROX),模板DNA,引物和RNase-free水。彻底混匀各溶液。
  • 根据下表准备反应体系:
    成分用量浓度
    2×Taqman qPCR Mix(Low ROX)10μL
    TaqMan ProbeVariable100~300 nM
    Forward PrimerVariable100~500 nM
    Reverse PrimerVariable100~500 nM
    RNase-Free ddH2OVariable
    Template DNAVariable≤ 500ng/reaction
    Total Volume20μL
  • 根据下列循环程序运行qPCR:
    步骤温度时间(标准)时间(快速)循环数
    预变性95℃10min10min1
    变性95℃15sec3sec 40
    退火/延伸60℃60sec30sec



可能原因意见和建议
无任何荧光信号
循环程序设置错误。检查仪器设置是否与实验相符。
缺少组分(比如引物、探针或模板)。检查反应混合液的组分。
探针标记的不够好。重新标记探针。
循环程序缺少必要步骤检查循环程序。
反应管是空的,未加入相应试剂离心后检测PCR板中的每一个孔
荧光信号增加较迟
循环程序设置错误。检查仪器设置是否与实验相符。
起始模板不足。检查模板浓度的计算;如果有可能则提高模板浓度。
退火温度过高。利用梯度优化退火温度;如果梯度特征不明显,则退火温度按每2℃为一个梯度进行递减。
探针标记的不够好。重新标记探针。
扩增片段长导致延伸时间不足。增加延伸时间。
引物或探针浓度过低。提高引物浓度(每个引物最高为900 nM)。250 nM探针浓度通常足够。
PCR程序不合适。确保使用的是推荐的PCR程序。如有需要,以推荐的程序未出发点进行优化。
荧光信号正常但效率低
吸量误差。检查反应混合液的组成。
前面反应形成的引物二聚体污染了体系。PCR循环开始前用UNG处理。
引物或探针设计不完善或模板浓度非常低。重新检查引物和探针设计及模板浓度。
探针标记的不够好。重新标记探针。
样品中的抑制成分影响反应。重新纯化DNA。
初始模板浓度低。提高模板量。
标准曲线的C(t)和模板含量的对数值非线性相关。
模板稀释不准确。重新进行系列稀释并保证样品混合均匀。
模板含量太高。减少模板含量;提高反应液体积。
模板含量太低。提高模板含量。
引物二聚体被共同扩增。重新设计引物。

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